AccQ•Tag 試薬は化合物の第一級アミンおよび第二級アミンの両方の位置で反応しますか? - WKB78677
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環境
- アミノ酸分析 (AAA)
- リジン
- 誘導体化
回答
理論上では、同じ分子上の第一級アミンおよび第二級アミンの両方が反応します。
実際には、これを高い再現性・信頼性で発生させるために、手順を最適化する必要がある場合があります。
(「追加情報」を参照してください)。
追加情報
標準試料中の各アミノ酸は、化学的特性に応じて異なる速度で誘導体化されます。
リジンには 2 つの第一級アミンがあります。正常な場合は、2 回誘導体化された Lys ピーク 1 本が得られます。これが最大のピークになります。誘導体化の問題をトラブルシューティングするとき、2 番目のリシンピークが観察されることがあります。2 番目のリシンピークは 1 つのアミン基でのみ誘導体化されています(これは、誘導体化プロセスが適切に進んでいない、サンプルが多すぎる、試薬が劣化している、pH が低すぎる、サンプルが正しく混合されていないことなどを示唆しています)。これにより、より低いレスポンスのモノ誘導体化されたリシンが得られます。
リシンの(2 番目の)第一級アミンは最も反応が遅く、迅速に誘導体化されませんが、試薬ピーク(第一級アミンおよび第二級アミンの 1/1000 の速度で水分子の OH 基と反応)は依然として通常のサイズになります。
すべての第一級アミンおよび第二級アミンを誘導体化するために、反応手順を最適化する必要がある場合があります。次のいずれかを改善または修正します:サンプルが多すぎる、試薬が劣化している、pH が低すぎる、サンプルが正しく混合されていない
id78677, 2695UP, amino acid, lysine, primary, プライマリー