BEH125 SEC タンパク質標準試料混合液 (186006519) を使用して、ACQUITY UPLC Protein BEH SEC 125Å、1.7 µm、4.6 mm × 150 mm カラム (186006505) で検量線を作成できますか？ - WKB228431

環境

• 超高速高分離液体クロマトグラフィー (UPLC)
• 架橋エチレンハイブリッド (BEH)
• サイズ排除クロマトグラフィー (SEC)
• タンパク質分離
• BEH125 タンパク質標準試料
• ACQUITY UPLC Protein BEH SEC

回答

いいえ

追加情報

いかなる種類の検量線に基づいて未知のタンパク質の分子量を決定することはできません。
この理由は、溶液中での 2 つのタンパク質の分子量が同じであるが、サイズ（流体力学的半径）が異なる可能性があるためです。
そのため、ポリマーのような生体分子に対して検量線を作成することはできません。

Waters が公開している SEC カラムの検量線は、GPC カラムの検量線と同じではありません。
公開されている SEC 検量線は、ポアサイズに基づくそのカラムの上限と下限を示すためだけに作成されています。
これは実際にはタンパク質の MW ではなく、流体力学的半径に基づいています。テストしたタンパク質の MW が分かっているため、MW の範囲を指定できます。

ACQUITY UPLC BEH SEC Columns and Standards Care & Use Manual（『ACQUITY UPLC BEH SEC カラムおよび標準試料の維持管理マニュアル』）

Guide to Size-Exclusion Chromatography (SEC) of mAb Aggregates, Monomers, and Fragments（『サイズ排除クロマトグラフィー (SEC) 最適化ガイド』）