SEC メソッドの実行時にバッファーのモル濃度を増加すると、凝集体の割合が増加するのはなぜですか？ - WKB229751

環境

• サイズ排除クロマトグラフィー (SEC)
• 高分子量種 (HMWS)
• 凝集体
• 二量体
• 三量体

回答

塩のモル濃度が増加すると、疎水性相互作用が増強し、タンパク質凝集の速度が増加します。

追加情報

Alliance システムまたはこの機能を備えた他の Waters LC システムの Autoblend 機能を使用して、pH およびモル濃度の試験を実施し、これらの変化がタンパク質の挙動にどのように影響するかを確認します。

pH 6.0 で一定量の 20 mM リン酸バッファーを使用します
pH 6.0 では：
100 mM 塩化ナトリウムの移動相を使用する - 結果をモニターする
150 mM 塩化ナトリウムの移動相を使用する - 結果をモニターする
200 mM 塩化ナトリウムの移動相を使用する - 結果をモニターする
250 mM 塩化ナトリウムの移動相を使用する - 結果をモニターする

pH 6.5 で一定量の 20 mM リン酸バッファーを使用します
pH 6.5 では：
100 mM 塩化ナトリウムの移動相を使用する - 結果をモニターする
150 mM 塩化ナトリウムの移動相を使用する - 結果をモニターする
200 mM 塩化ナトリウムの移動相を使用する - 結果をモニターする
250 mM 塩化ナトリウムの移動相を使用する - 結果をモニターする

pH 7.0 で一定量の 20 mM リン酸バッファーを使用します
pH 7.0 では：
100 mM 塩化ナトリウムの移動相を使用する - 結果をモニターする
150 mM 塩化ナトリウムの移動相を使用する - 結果をモニターする
200 mM 塩化ナトリウムの移動相を使用する - 結果をモニターする
250 mM 塩化ナトリウムの移動相を使用する - 結果をモニターする

pH 7.5 で一定量の 20 mM リン酸バッファーを使用します
pH 7.5 では：
100 mM 塩化ナトリウムの移動相を使用する - 結果をモニターする
150 mM 塩化ナトリウムの移動相を使用する - 結果をモニターする
200 mM 塩化ナトリウムの移動相を使用する - 結果をモニターする
250 mM 塩化ナトリウムの移動相を使用する - 結果をモニターする

これは、どの pH および NaCl のモル濃度が最適な結果を提供するかを実際に判断するのに適した方法です。