逆相 LC メソッドでは、1 つや 2 つのピークの保持時間のみがシフトしても、同じメソッドの他のピークの保持時間がシフトしないのはなぜですか？ - WKB229859

環境

• 逆相 LC
• トラブルシューティング
• ピークのシフト
• 保持時間

回答

考えられる原因：

• 移動相の pH がドリフトしており、イオン性化合物の保持時間が変化することがあります。
• サンプル希釈液中の強有機溶媒の割合が高すぎると、最も最初に溶出するピークにばらつきが発生することがあります。
• バッチ間の特定のメソッド条件下での特定の分析種の選択性の違い。

追加情報

移動相 pH が、シフトしている分析種の pKa より 2 pH 単位超または pKa 未満である場合、メソッドをより堅牢にするために、すべての分析種のに対して、それらの pH を少なくとも 2 pH 単位超または pKa 未満に調整することを試行します。

Waters は、分析法バリデーションの際に、3 つの異なるバッチ（ゲルロット）の 3 本のカラムをスクリーニングすることを強く推奨します。これが要点です。多くの「ロット」をスクリーニングしても、1 つのバッチのみが使用されることがあります。ほとんどの Waters カラムでは、ロット番号（またはシリアル番号）の最初の 4 桁は、カラムの充塡に使用されたバッチ（ゲルロット）を示します。Waters は、それぞれの充塡剤が異なるバッチからの 3 本のカラムが含まれている分析法バリデーションキット (MVK) で、カラムを多く販売しています。バリデーションに使用した 3 つのバッチ間のばらつきは、メソッドが堅牢ではなく、メソッドの使用期間中にバッチのバリエーションの影響を受けやすいことを示します。

参照資料：

Waters カラムの 14 桁のシリアル番号をどのように解釈すればよいですか？

分析法バリデーションのウォールチャート