LC カラムのキャリーオーバーまたはゴーストピークをトラブルシューティングするためのヒント - WKB246120
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環境
- トラブルシューティング
- キャリーオーバー
- ゴーストピーク
回答
ブランク注入時にキャリーオーバーが発生した場合、キャリーオーバーまたはゴーストピークの原因を特定するために、いくつかのことを試す必要があります。
- グラジエントメソッドの場合、ダブルグラジエントを使用してブランク注入を実行します。*
- これは、移動相（移動相に含まれるもの、移動相に浸出するもの）またはサンプル/インジェクターに対して問題を特定するのに役立ちます。
- アイソクラティックメソッドの場合、メソッドの終了時間の 2 倍のデータを収集し、メソッドの終了時間後にピークが溶出するかどうかを確認します。
- 分析時間後にピークが溶出した場合、これらのピークは次のサンプル注入中に現れます。
- 注入量実験を実行して、注入量を変更したときに未知試料ピークの面積が変化するかどうかを確認します。
- 注入量を大きくするとピーク面積が増加する場合は、原因がバイアルにある可能性があります。
- 注入量を増やしてもピーク面積が増加しない場合は、原因がインジェクター、バイアルセプタム、または移動相にある可能性があります。
- 注入量がゼロの注入を実行します。
- このテストは、バイアルセプタムが未知試料ピークの原因である可能性があるかどうかを確認するために実行されます。
- 誘導体化が必要なサンプルの場合：
- サンプル希釈液が誘導体化されていない状態で、ブランク注入を実行します（このブランク注入に見られるものが、誘導体化されていない汚染物質に由来するかどうかを確認するために）。
- サンプル希釈液が誘導体化されている状態で、ブランク注入を実行します（このブランク注入に見られるものが、誘導体化されている分析種および/または汚染物質に由来するかどうかを確認するために）。
潜在的な原因が特定されたら、問題を修正するための手順を行います。
追加情報
*ダブルグラジエントテストでは：
- 初期メソッドグラジエントから開始して、再平衡化ポイントに到達するまでのグラジエントテーブルを作成します。
- その時点で、再平衡化の間、20 分間の保持時間を追加します。
- 次に、初期グラジエントを再度追加します。
- 通常のグラジエントを使用してブランク注入を 1 回実行し、直後にダブルグラジエントを使用してブランク注入を実行するようにしてください。
ダブルグラジエントの前半にピークが見られるが、後半に見られない場合は、これは、ピークの原因が移動相にあるのではなく、サンプル、バイアル、セプタムまたはインジェクターにある可能性があることを意味します。
ダブルグラジエントの前半と後半にピークがある場合は、ピーク面積カウントを確認します。ダブルグラジエントの後半のピーク面積が高い場合は、これは、問題の原因が移動相にある可能性が高く、水である可能性があることを意味します。
ダブルグラジエントの前半と後半にピークがある場合は、ピーク面積カウントを確認します。両方のピークで同様なピーク面積がある場合、これは、問題の原因がカラムにある（何かが蓄積し、すべてのグラジエントで溶出の量が同程度）ことを意味します。
この種類のトラブルシューティングの詳細については、Carryover_Ghost Peak Troubleshooting.pdf を参照してください。
関連項目：Blog - Carryover troubleshooting - includes double gradient - for Waters Knowledge Base.pdf
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