空および完全な AAV カプシドアプリケーションノートにおける 10% TMAC での初期ホールドの目的は何ですか? - WKB256289
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環境
- Protein-Pak Hi Res Q カラム
- 陰イオン交換
- 塩化テトラメチルアンモニウム (TMAC)
- アデノ随伴ウイルス (AAV)
- クオータナリーポンプグラジエント
- IEX
回答
10% TMAC 塩は、塩環境でカラムを平衡化し、クロマトグラムでスクリーニングされるほとんどの AAV 血清型に対して、より再現性のあるピーク形状と分離が得られるように使用されます。
追加情報
イオン交換カラムは、100% 水ではなく塩の存在があると、より迅速に平衡化します。
一部の AAV 血清型(AAV9 など)は溶出が早く、カラムに保持するために塩の初期割合を低くする必要があるため、グラジエント条件を開始点としてとらえる必要があります
AAV 9 の場合、TMAC は 20 分で 0 から 200 mM になります(図 7b)。
追加情報については、Anion-Exchange Chromatography for Determining Empty and Full Capsid Contents in Adeno-Associated Virus(陰イオン交換クロマトグラフィーによるアデノ随伴ウイルスの空のカプシドと完全なカプシドの含量の測定)を参照してください。
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