アイソクラティックメソッドまたはグラジエントメソッドの実行中に、新しい C18、C8、C4（または他の逆相）カラムの保持が、製品番号の同じ古いカラムより長いのはなぜですか？ - WKB57068

環境

• C18 カラム
• カラムの比較

回答

新しい C18 カラムは古い C18 カラムよりも多くの C18 リガンドおよびエンドキャップ基を持つ傾向があります。

新しいカラムでは、生体分子がより非特異的に吸着され、これにより保持時間がわずかに長くなることがあります。

追加情報

新しい C18 カラム（パーツ番号の同じ古い C18 カラムと比較して）が、より長い保持を示す理由はたくさんあります。

一般的な原因は、加水分解の結果として古いカラムに C18 リガンドが失われていることです。

カラムがリガンドを失うと、表面の疎水性はますます低くなります。パーツ番号の同じ新しい C18 カラムを取り付けると、場合によっては保持時間が著しく長くなることがあります（特に古いカラムが数年使用されている場合）。

さらに、古いカラムでは加水分解によりエンドキャップ基が失われていることがあります。カラムでエンドキャップ基が失われると、より多くのシラノール基が露出します。これにより、より極性の高い粒子表面が得られ、古い粒子での負の表面電荷量が増加します。これは保持と分離係数に大きな影響を与えます。

生体分子を分析している場合：ウシ血清アルブミンなどの生体分子を繰り返し注入すると、カラムが表面安定化し、新しいカラムへの分析種の非特異的吸着を最小限に抑えることができます。