メインコンテンツへスキップ
Waters Japan

C18 カラムを使用して逆相メソッドで分析するとき、塩基性化合物のテーリングを低減する方法 - WKB92122

Article number: 92122To English version

環境

  • C18 カラム
  • 逆相メソッド

回答

使用している粒子の種類に応じて、さまざまなオプションがあります。[追加情報]セクションを参照してください。

追加情報

C18 カラムでの塩基性化合物のテーリングは、粒子表面上のシラノール基がイオン化(脱プロトン化、負に帯電)し、弱塩基がイオン化(プロトン化、正に帯電)するために発生します。(実際に、強塩基は常にイオン化(プロトン化、正に帯電)します。)

テーリングの問題を緩和するための、粒子の種類に基づくオプションを以下に示します:

ハイブリッド充塡剤:

架橋エチレンハイブリッド (BEH) C18(pH 範囲 1 ~ 12):

  • 低 pH 移動相(pH が約 2.0 ~ 3.0)を使用してシラノール基を中和し、テーリング量を低減できます。
  • 高 pH 移動相(pH が約 10.0)は弱塩基の中和とテーリングの緩和に使用できます。高 pH は強塩基の中和には使用できません。
  • イオン対試薬を使用すると、表面のシラノール基と正に帯電した塩基性分析種との間の陽イオン交換メカニズムをブロックできます。
    • 水系移動相と有機移動相の両方とも 0.1% TFA(トリフルオロ酢酸)を使用できます。
      • TFA により pH が約 2.0 に低下し、シラノール基が中和されます。
      • TFA はまた、荷電塩基の正電荷とイオン対を形成し、陽イオン交換メカニズムをブロックします。
    • PIC(イオン対クロマトグラフィー)試薬は、陽イオン交換メカニズムをブロックし、テーリングを低減するのに使用できます。

表面チャージハイブリッド (CSH) C18(pH 範囲 1 ~ 11):

  • この充塡剤では、多くの場合、0.1% ギ酸を含む低 pH 移動相(pH が約 3.0)により、弱塩基と強塩基、両方のテーリングを低減できます。
  • 高 pH 移動相(pH が約 10.0)は弱塩基の中和とテーリングの緩和に使用できます。高 pH は強塩基の中和には使用できません。
  • この荷電充塡剤の正の表面電荷は、分析種の正電荷を反発するのに役立ち、陽イオン交換メカニズムを最小限に抑え、テーリングを低減します。
  • 0.1% のギ酸でテーリングを十分に低減できない場合は、0.05% ~ 0.1% TFA とのイオン対の使用が役に立つことがあります。


シリカベースの充塡剤(pH 範囲は通常 2.0 ~ 8.0):

  • シリカベースの C18 を使用する場合、高 pH を使用して弱塩基を中和することはできません。(シリカは pH 8.0 以上で溶解します。)
  • 低 pH 移動相(pH が約 2.0 ~ 3.0)を使用してシラノール基を中和し、テーリング量を低減できます。
    • 水系移動相と有機移動相の両方で 0.1% ギ酸を使用すると効果的です。
    • 他の酸性添加剤を使用します。
  • イオン対試薬を使用すると、表面のシラノール基と正に帯電した塩基性分析種との間の陽イオン交換メカニズムをブロックできます。
    • 水系移動相と有機移動相の両方とも 0.1% TFA(トリフルオロ酢酸)を使用できます。
      • TFA により pH が約 2.0 に低下し、シラノール基が中和されます。
      • TFA はまた、荷電塩基の正電荷とイオン対を形成し、陽イオン交換メカニズムをブロックします。
    • PIC(イオン対クロマトグラフィー)試薬は、陽イオン交換メカニズムをブロックし、テーリングを低減するのに使用できます。

PIC Reagents Care&Use Manual(『PIC 試薬維持管理マニュアル』)

HPLC カラムカタログ

ハイブリッドパーティクルテクノロジー:パート 1:XTerra ホワイトペーパー

ハイブリッドパーティクルテクノロジー:パート 2:BEH:ホワイトペーパー

ハイブリッドパーティクルテクノロジー:パート 3:CSH:ホワイトペーパー

id92122, ion pair, TFA, trifluoroacetic acid, イオンペア