Sirocco タンパク質沈殿プレート（186002448 または 186003873）の標準操作手順は何ですか？ - WKB119433

環境

• Sirocco

回答

Sirocco タンパク質沈殿プレートの標準操作手順は以下のとおりです。

ステップ1-準備

シロッコプレートをコレクションプレートの上にセット。これにより、処理中にバルブの先端が保護されます。

ステップ2–沈殿用有機溶媒（アセトニトリル）の添加

すべてのウェルに沈殿溶媒を添加します。サンプルに対して少なくとも3：1の溶媒の比率を使用します。推奨される沈殿溶媒はアセトニトリルです。Siroccoプレートは、このステップで溶媒がプレートから漏れるのを防ぐように設計されています。

ステップ3–サンプルをロードする

20〜200 µLのサンプル（血漿、尿など）をウェルにすばやく加えます。沈殿用有機溶媒へサンプルを素早く添加、ミキシングし沈殿プロセスが開始されます。

ステップ4–シール

キャップローラーを使用してベント付きキャップマットをセットし、確実で均一なシーリングを行います。これにより、ミキシング中の飛沫やクロストークを防ぐことができます。

ステップ5–ミックス

ロードされたSiroccoプレート/コレクションプレートアセンブリをボルテックス（VWRのMulti-Tube Vortexerなど）で中程度の設定（1〜10のスケールで設定5など）で0.5〜1.0分間振とう（混合）します。

注：ろ過する前に、ベント付きキャップマットやバルブチップをシロッコプレートから取り外す必要はありません。これにより、ウェル間のクロストークのリスクが排除されます。バルブとベント付きキャップマットは、真空下で開くように設計されており、ろ過中の流れを制御できます。 注：設定が高すぎる場合（たとえば、1〜10のスケールで設定8）に過度に混合すると、クロストークが発生する可能性があります。混合中（たとえば、2を1〜10のスケールで設定）、目詰まりやろ液の濁りが発生します。

ステップ6–フィルター

混合後、Siroccoプレートを真空マニホールド（例：Waters真空マニホールド 186001831）に置き、8〜5インチHg（271〜508 mbar）の真空を最大3分間適用します。 10インチHgで流量が発生しない場合は、より高い真空設定ができます。 注：Sirocco独自のバルブチップ設計により、最低5インチHg（169 mbar）の真空が適用されるまで、デバイスを通る液体が流れません。 注：シロッコプレートは、真空装置の代わりに遠心分離（@ 2,000 x gで1分間）を使用してろ過できます。

ステップ7–分析

Siroccoプレートを外し、透明なろ液を含む収集プレートを真空装置から取り外し、密封してLC/MSオートサンプラーに移すか、後で分析するために保管します。 注：Siroccoプレートからキャップマットやバルブチップを取り外す必要はありません。シロッコプレートはろ過後に廃棄します。

追加情報

Sirocco Protein Precipitation Plate 720003377EN Care & Use
https://www.waters.com/waters/suppor...1442&type=USRM