PDA および QDa 検出器での多成分ピーク純度 - Tip 258

目的または目標

ピークがスペクトル的に純粋ではないと結論付けたら、クロマトグラフィーピークの下にあるスペクトル的に異なる成分の数を知りたい場合があります。多成分ピーク純度が役立ちます。その方法が以下に示されています。

環境

• Empower
• 今週の Empower Tip #258

手順

ステップ 1
1 つのサンプルにあるカフェインピークを見ると、ピークがスペクトル的に純粋ではないことが結論づけられます。純度アングルは純度許容差より大きく、［純度プロット］では、許容差の線より上に、ピークのテールに向かって純度の線が表示されます。（この画面は、［結果］ツールを選択して［レビュー］にあります）（図 1）。

ステップ 2
マーカーを追加して、純度アングル/純度許容差の比の最大値を持つピーク全体のポイントである「最低純度点」を表示します。プロットのプロパティで［ピーク頂点/最低純度点にラベルを付ける］を選択します（図 2）。

ステップ 3
カフェインピークの下にあるスペクトル的に異なる成分の数を判断するには、［解析メソッド］の［純度］タブに移動し、［純度パス］機能を使用します。既定では、［純度パス］は「1」です（図 3）

ステップ 4
［純度パス］を「2」に設定すると、Empower は次の 2 つの分析スペクトルを選択します：純度パス 1 の「頂点スペクトル」と「最低純度スペクトル」。次に、Empower はこれら 2 つの分析スペクトルを、ピーク全体の残りのスペクトルそれぞれと比較します。
• 各ピークスペクトルに対して、Empower は 2 つの分析スペクトルを合計して、モデルスペクトルを生成します。
• 合計を作成するとき、Empower はまず各分析スペクトルにスケーリング係数を適用します。モデルスペクトルの形状とノーマライズは、これらのスケーリング係数の値によって異なります。
• Empower は、2 つのスケーリング係数を調整し、モデルスペクトルの形状とノーマライズを変えて、目的のピークスペクトルに最小二乗の意味で最もよく一致するモデルスペクトルを見つけます。
• Empower は、この最適マッチのモデルスペクトルと目的のピークスペクトルの間のスペクトルコントラストアングルを計算します。Empower は、2 番目の純度パスの［純度プロット］にこのアングルをプロットします。

• 各ピークスペクトルに対して上記のステップを繰り返した後、Empower は、ピーク全体の 2 番目の純度パスの純度アングルをプロットし、2 番目の純度パスの純度アングルを計算し、純度パス 2 の最低純度スペクトルを見つけます。
• 3 番目の純度パスでは、Empower は、頂点スペクトル、純度パス 1 からの最低純度スペクトル、および純度パス 2 からの最低純度スペクトルを使用してモデルスペクトルを作成し、続行します。
• 4 番目の純度パスでは、何が起こるかご存知だと思います。

目的のスペクトルと分析スペクトルがすべて 2 つの化合物の混合物である場合、すべての目的スペクトルが一致し、2 つの分析スペクトルの「優れた適合」それぞれの合計が得られるため、計算は機能します。目的のスペクトルと分析スペクトルがすべて 3 つの化合物の混合物である場合、一部の目的スペクトルは 2 つの分析スペクトルの「優れた適合」合計に一致せず、3 つの分析スペクトルのすべての「優れた適合」合計に一致します。

ステップ 5
2 つの純度パスでデータを再解析すると、次のようになります。2 番目の純度パスの純度アングルが純度許容差未満であり、2 番目の純度パスの［純度プロット］で、ピークにわたって緑色の線が青色の線の下に表示されます。プロットで「M」が付いている線は、純度パス 1 からの最低純度点であり、「2」が付いている線は、純度パス 2 からの最低純度点です（図 4）。

ステップ 6
このピークの結論は、ピークの下にスペクトル的に異なる 2 つの成分、カフェインと不純物があるということです。各純度パスの結論をまとめたチャートを参照してください（図 5）。

追加情報

最後の注記：これは、Pro または QuickStart インターフェースで実行できます。