SYNAPT G2-XS または Xevo G2-XS で DESI XS ソースを使用して画像を取り込む方法 - WKB287509

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目的または目標

SYNAPT XS または Xevo G2-XS で脱離エレクトロスプレーイオン化 (DESI) イメージを取り込む。

環境

DESI XS イオンソース
SYNAPT XS
Xevo G2-XS
HDI 1.7
MassLynx

手順

できれば ESI-Lockspray ソースエンクロージャーを使用して、装置のセットアップ（検出器のセットアップおよびキャリブレーション）を実行します。
WKB254643 の説明のとおりに DESI XS ソースを取り付けます
DESI XS Ion Source Overview and Maintenance Guide（『DESI XS イオンソース概要およびメンテナンスガイド』）のセクション 4.7.1（「インレットメソッドの変更」）の説明に従ってインレットファイルを設定します
ターゲットスライドを選択します（例：700012809 スライド 26 mm × 76 mm または 700012675 大きなスライドの低プロファイルまたは 700012809 - 26 mm × 76 mm、44 ウェル、Micro-44）。
正しいターゲットスライドホルダー（小ターゲットまたは大ターゲット）が DESI XS ソースに取り付けられていることを確認します。必要に応じて交換します。
DESI スライドの左上コーナーを、ネガティブ極性の場合は Stadler Lumcolor 黒色マーカー (700011044)、m/z 666.0600、ポジティブ極性の取り込みの場合は、赤色のマーカー (700010626)、m/z443.2335 でマークします。
ターゲットをスポットします（例：ティッシュまたは希釈したサンプルでのスポット）
準備した DESI のスライドから写真を撮る。
DESI XS Ion Source Overview and Maintenance Guide（『DESI XS イオンソース概要およびメンテナンスガイド』）のセクション 5.1（「全般操作パラメーター」）の説明に従ってスプレーヤー位置を最適化します
流量を設定します（例：2 µL/分、95% MeOH、5% H2O または既定の 98% MeOH、2%H2O および 0.01% FA）。
［MS Tune］画面を開き、［Operate］（オペレート）に移動し、キャピラリー電圧を設定します（通常はポジティブの場合は 0.5 kV、ネガティブの場合は 0.3 kV）。これらの値は、スプレーヤーヘッド (DESI XS) または接続の種類（細い電圧ケーブルまたは太い電圧ケーブル）によって異なる場合があります。通常は印加電圧の赤色の値を観察します（ポジティブモードでは約 0.6 kV、ネガティブ極性では約 0.5 kV）。イオンビームの安定性を観察します。
DESI XS タブから、DESI ソースコントロールを開きます。
その領域をクリックして、DESI スプレーヤーをターゲットの外側に移動し、左上コーナーの上に移動します。次に、［原点の選択］をクリックします。
DESI スプレーヤーを DESI スライドの左上コーナーに向かって手動で移動し、インクマーカーから最も強いシグナルが得られるポイントを観察します。
これらの座標をスロット A 開始点 X および Y として設定します。
HDI ソフトウェアを開き、［Add New Plate］（新しいプレートの追加）を選択します。
ソフトウェアを使用して、スライドの画像 (jpeg) を選択し、使用するスロット A または B および顕微鏡スライドの正しい寸法（ルーラーを使用して測定できます）を定義し、画像の 4 隅を時計回りに定義します。
取り込みパラメーターを定義します。
長方形ツールを使用して、取り込みの領域を定義します。
［Pattern］（パターン）タブで、ピクセルサイズ（50 µm など）を定義し、取り込み流量を µm/秒単位で調整して、例えば 0.5 ～ 1.0 秒のスキャン時間にします。
［解析］タブで、解析パラメーターを定義します。
- 最も強度が高いピークの数字は 100 ～ 2000 である可能性がある

- ［Mass Window］（質量ウィンドウ）は、ロックマスなしで MS ピーク幅（ここでは 0.038）および許容範囲（ここでは 0.05）であり、約 20000 の分離に対して、ロックマスは約 0.02 です。

- レファレンス計算で決定された MS 分解能（または、強度 1e4 の［MS Tune］画面で決定）。
- ロックマスは溶媒での適用が可能ですが、イオン化抑制が発生し、エミッター先端に析出する傾向があります。使用後の適切なフラッシュ洗浄が必要です。したがって、内部内因性ロックマス（例：ホスファチジル-コリン C4H82NO8P [M+K]+ 798.54096、[M+H]+ 760.58508 またはホスファチジル-イノシトール C47H83O13P [MH]- 885.54985）が推奨される場合があります。

注：解析は後で調整できます。
パターンファイル (.pdm) を保存します。
現在の設定を含む MassLynx ワークシートを .txt 形式でエクスポートします。注：ファイルは、選択したプロジェクトの Sample DB フォルダーに保存されます。
MassLynx で、［Import worksheet］（ワークシートのインポート）を選択し、ファイルの種類 csv、txt を定義し、プロジェクトの SampleDB フォルダーに保存されているエクスポートされたワークシートを選択します。
MS ファイル、パラメーターファイル、解析オプションを含む MassLynx サンプルファイルが生成されます。
注：正しいサンプルリスト形式 (HDI.fmt) ファイルは、インストールドライブ/HDI/docs から読み込むことができます。
MassLynx で、サンプルリストを .spl ファイルとして SampleDB フォルダーのプロジェクトに保存します。
MassLynx から、データを取り込んで解析します。
取り込みが完了すると、HDI によってデータが解析されます。
注：一部のエラー警告は正常である場合があります。
データを［Analysis］（分析）タブ内から HDI にインポートします。
必要であれば、画像ファイルをインポートし、取り込んだデータと画像の位置を合わせます。

追加情報

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