ACD（At Column Dilution、カラムでの希釈）とは何ですか？ - WKB207774

環境

• MassLynx 4.1
• MassLynx 4.2
• 自動精製システム
• FractionLynx

回答

At Column Dilution (ACD) は以下に使用されています。

• 比較的強いサンプル希釈液を比較的大量に注入すると、従来のシステムではクロマトグラフィーが歪むことがあります。
• サンプルループまたはカラム自体でバルク沈殿が発生しないようにします。

従来のシステムでは、サンプルは DMSO などの強い希釈液に溶解され、弱溶媒（多くの場合 95% 水溶液）の流れに挟み込まれたプラグとして、インジェクターからカラムのヘッドに送られます。このプラグの端で（強いサンプル溶媒が弱いクロマトグラフィー溶媒で希釈されている場所で）沈殿が発生することがあります。この沈殿物が流路を塞ぎ、高圧シャットダウンにつながる可能性があります。このような沈殿物がない場合は、サンプルは、カラムに入りますが、カラムのポア内で初期強度の移動相でサンプルプラグが希釈されるまで保持されません。大量に注入する場合、サンプルの希釈に必要な容量は、カラムに沿ってかなりの距離を移動することによってのみ得られます。このような場合、サンプルは幅の広いバンドとして沈殿し、カラム容量の大部分を占めます。このようなサンプルの溶出では、分離が不十分になり、重なるピークが大量の溶離液にわたって広がります。これらの問題は、注入するサンプルの容量と質量の両方を厳密に制限することで低減できます。代替手段は、サンプルを水（または最も一般的には弱溶媒）で十分に希釈して、十分な保持力を確保することです。スループットと回収率が低下するため、どちらのアプローチも完全に満足できるものではありません。必要なより多くの注入量は、システムに存在するインジェクターおよび流路系に適合しない可能性があります。

At-Column Dilution システムでは、システムは、サンプルプラグを強溶媒の流れでカラムヘッドまで送られるように再構成されます。カラムの入口で、この流れは水系移動相の流れで継続的に希釈されます。カラムへの送液速度が非常に高いため、沈殿は発生しません。次に、サンプル分子は、十分に分離された小容量ピークとして溶出される非常に狭いバンドとして充塡剤に吸着されます。

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