新しい逆相カラムで塩基性化合物のテーリングが多く、注入をさらに行うとテーリングが少なくなるのはなぜですか？ - WKB235916

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環境

逆相カラム
テーリング
ピーク形状
シラノール

回答

塩基性分析種のテーリングは以下のように発生します。

粒子表面の表面シラノール基 (Si-O^-) は通常、pH が約 2.0 を超えると負に帯電します。
塩基は通常、低 pH 環境で正に帯電します。
正に帯電した塩基が粒子表面の負に帯電したシラノール基とイオン対を形成するため、テーリングが発生します。

逆相のシリカベース粒子のカラムやハイブリッド粒子のカラムが新品で、お使いのメソッドのpH が 2.0 を超える場合：

表面のシラノールが負に帯電するため、カラムは逆相カラムおよび陽イオン交換カラムの両方として機能します。
注入が最初に行われると、塩基性分析種はこれらのシラノール基と完全にイオン対になります。

カラムに塩基性分析種をさらに注入すると：

前の注入からの塩基性分析種は、シラノール基とのイオン対によって充塡剤に吸着することがあります。
充塡剤への分析種のイオン対が多いほど、その後の注入から塩基性分析種を吸着するために使用できるシラノール基がますます少なくなります。
シラノールへの接触が少なくなるため、その後の注入でテーリングが少なくなることがあります。分析種とシラノールの相互作用を「ブロック」するこのプロセスは、「コンディショニング」と呼ばれます。

追加情報

この傾向が観察される新しいカラムのテーリングの量を低減する方法の 1 つは、高濃度の塩基性分析種の標準試料を新しいカラムに少なくとも 3 回「コンディショニング注入」を行うことです。このステップの目的は、活性部位（シラノール基）を塩基性分析種で飽和し、将来のサンプル注入での分析種とシラノールの相互作用をブロックすることです。