ピーク純度測定に適したデータ収集に関する注意事項 - Tip 251

目的または目標

今回のヒントでは、ACQUITY™ PDA 検出器と ACQUITY QDa™ 質量検出器の両方を使用して、ピーク純度に関する新しいシリーズを開始します。ピーク純度およびピーク純度測定に適したデータ収集の注意事項について説明します。

環境

• Empower
• 今週の Empower Tip #251

手順

ステップ 1
ピーク純度は、スペクトル純度またはスペクトル均一性です。化学的純度ではありません。ピーク全体のスペクトルを抽出してノーマライズすると、スペクトルは完全に重なり合いますか？重なり合っている場合、ピークの下に同一成分がある可能性があります。重なり合っていない場合、ピークの下に複数の成分があります。ACQUITY PDA 検出器の UV スペクトルを使用するか（図 1）、

 

ACQUITY QDa 質量検出器の MS スペクトルを使用して、ピーク純度を評価できます（図 2）。

 

ステップ 2
ACQUITY PDA 装置メソッドの以下のパラメーターは、ピーク純度を評価する際に重要です（図 3）。

• 波長範囲：移動相の UV カットオフより上で開始し、すべての吸光度領域を含む波長で終了します。波長の低い端で光を吸収する溶媒またはバッファーが移動相に含まれている場合、移動相による吸光度は、検出器の直線性ダイナミックレンジを、オートゼロで除去される吸光度の分だけ低下させます（図 4）。

• 分解能：最高のスペクトル分解能が得られる 1.2 nm を選択します（図 5）。

• サンプリングレート：最も幅の狭い対象ピークにわたって、少なくとも 12 のスペクトルを提供するレートを選択します。15 ～ 20 のスペクトルが最適です。

ステップ 3
ACQUITY QDa 質量検出器装置メソッドの以下のパラメーターは、ピーク純度を評価する際に重要です（図 6）

• 質量範囲：適切な範囲を選択します
• サンプリングレート：最も幅の狭い対象ピークにわたって、15 ～ 20 のスペクトルが得られるレートを選択します。質量検出器は、入力した質量範囲に基づいて、装置メソッドのサンプリングレートを調整します。これは、質量範囲が大きい場合、ソフトウェアによってサンプリングレートが低い値に自動的に調整されることを意味します。逆も同様です。つまり、範囲が小さい場合、サンプリングレートは高くなります。

ステップ 4
MaxPlot に従って、すべてのピークの吸光度を 1 AU 未満に維持します。なぜでしょうか？吸光度が高い場合、光度測定エラーにより複数の効果が組み合わされ、ベールの法則からわずかに逸脱することがあります（約 1%）。このレベルの誤差は定量にほとんど影響しませんが、スペクトルの不均一性の原因となり、スペクトルの歪みを引き起こすことがあります（図 7）。

したがって、ピーク純度を測定するために使用されるスペクトルコントラスト計算の光度測定エラーの影響を最小限に抑えるには、化合物の最大スペクトル吸光度を 1.0 AU 未満にする必要があります（図 8）。

ステップ 5
直線性の 5% エラーは、ピーク純度の結果に大きな影響を与える可能性があります（図 9）。

追加情報

最後の注記：これは、［プロフェッショナル］または［クイックスタート］インターフェースで実行できます。