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ベースラインノイズ:手動計算 - Tip 294

Article number: 242645To English version

目的または目標

手動計算から始めて、シグナル対ノイズ比計算のベースラインノイズを測定する。

環境

  • Empower
  • 今週の Empower Tip #294

手順

ステップ 1
ノイズは通常、ベースラインが比較的平坦で、誤ったクロマトグラフィーピークがないクロマトグラム領域で測定されます。ノイズが測定されるベースラインのこの代表的なセクションは通常、クロマトグラフィーの分析時間に比例します(図 1)。
Figure_1.png

ステップ 2
シグナル対ノイズ比を計算するためにノイズを測定するとき、選択されるノイズ領域は通常、対象のクロマトグラフィーピークのピーク幅に比例します(図 2)。
Figure_2.png

ステップ 3
表示されたベースラインのセクションを使用して、ベースラインノイズの測定を明らかにすることを非常に難しくする状況をいくつか探索してみましょう。

  1. 検出限界 (LOD) や定量下限 (LOQ) のような重要なバリデーション要因をノイズ計算に基づいている場合、異なるクロマトグラフィーソフトウェアパッケージでの様々な計算の使用は、ユーザーを特に不満に感じさせます。
  2. 複数のベンダーのクロマトグラフィーソフトウェアが日常的に使用されているラボでは、異なるソフトウェアパッケージの違いを除去するために、化学者がクロマトグラフィーノイズの手動計算を使用することは珍しくありません。
  3. 単一ベンダーのソフトウェアが使用されている環境では、化学者がソフトウェアのノイズ計算に頼ることが一般的です。異なるソフトウェアが使用されているラボにメソッドを移管する場合、または異なるベンダーのソフトウェアに切り替えることを決めたラボでは、これらの環境で問題が発生することがあります。

手動計算は主観的で、時間がかかります。自動計算は、使用するベンダーのソフトウェアによって異なります。一貫性を得るために、ラボは何をする必要がありますか?答えは、自分のラボと、開発および設定したメソッドの対象となるラボで、各ソフトウェア製品で使用される計算を理解することです(図 3)。
Figure_3.png

ステップ 4
ノイズを手動で測定する場合、多くの化学者を集めて、クロマトグラムの例におけるノイズの底部がどこにあるかについて同意させる必要があるかもしれません。しかし、上部の線をどこで引くかは、より大きな議論の対象となる可能性があります。ノイズの規模はどこで測定するべきでしょうか?クロマトグラムの右側で測定するか、あるいはクロマトグラムの左側で測定するか?この問題を解決するには、上部の線と下部の線が平行である必要がありますか(図 4)?
Figure_4.png

ステップ 5
平行線はどこに置きますか?外れ値としての 26.6 分でのスパイクを除去しますか?このクロマトグラムでスパイクを含める場合、測定されたノイズが拡大されることになりますか?これらの外れ値のない別のセクションを選択して、ノイズを測定する必要がある可能性があります(図 5)。
Figure_5.png

STEP 6
このセクションはどうですか?ノイズを実際にここで測定する必要があると示唆しているわけではありません。これはあなたのラボの化学者が行うこととしては極端すぎるかもしれませんが、分析者が適切なトレーニングされることもなく、使用する時間範囲やスケーリングして使用する Y 軸などの特定の変数が分析メソッドに書かれていない状態で、手動計算を行うことの非常に主観的な性質を示しています(図 6)。
Figure_6.png

手動計算が主に主観的であり、バリデーション済みのラボ環境での境界線の結果に問題が発生する可能性があることに注意しています。ピーク間ノイズなどの自動計算の使用については、次回の「今週のヒント」で説明します。

追加情報

これは、Pro または QuickStart インターフェースで実行できます。

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