不十分な分解能または不良なピーク形状により、QTof（Xevo、Cyclic または SYNAPT）でのキャリブレーションが失敗する - WKB1813

症状

• Xevo または SYNAPT QTof でのキャリブレーションまたはキャリブレーションチェックが失敗する
• キャリブレーションは実行されるが、一部のピークが一致せず、手動で追加できない（一致するピークは 1 つのみ）
• ピークに感嘆符 (!) が付く場合がある
• 高質量で残留質量が増加する（下図を参照）
• 質量精度が不足している
• GluFib での分解能が不十分

環境

• MassLynx
• IntelliStart
• UNIFI
• SYNAPT XS
• SYNAPT G2-Si
• SYNAPT G2-S
• SYNAPT G2
• Xevo G2-XS
• Xevo G2-S
• Xevo G2
• Xevo QTof

原因

スペクトルの分解能が不十分か、またはピーク形状が不良です

解決策

1. ［MS Tune］画面を開き、［Setup］（セットアップ） > ［System View］（システム画面の表示）を選択して分解能を調整します（パスワードは「access」）。
2. キャリブレーション溶液が新しく調製されたものであることを確認するか、新しいサンプルを注文します。
3. ［Tune］画面で［System］（システム） > ［Acquisition Settings］（取り込みの設定）を選択します。画面左下に表示されている分解能の値（この分解能モードで予想される分解能）を書き留めてから、画面を閉じます。
4. ロックマスのピークをズームインしてロックスプレーのキャピラリー電圧を下げるか、［System 2］（システム 2） タブにアクセスして［pDRE Test］（pDRE テスト）エリアで［Attenuate］（減衰）を選択し、送信を調整することにより、カウントを中〜低 e4 カウントに調整します。または、［MS Tune］画面でピークを右クリックし、［Intensity］（強度）> ［Normalize Data］（データのノーマライズ）を選択することもできます。この設定では、分解能を調整する際に強度が増減するかを確認できます。
5. その形状を簡単に把握できますよう、ピークを拡大表示します。
6. ［System 2］画面で、数字の右側に黒色で表示されるスライダーをクリックしてから、キーボードの左矢印キーと右矢印キーを使って、reflectron grid を調整します。分解能を最高の優先度として、分解能やピーク形状、および感度が最適になるよう調整します。
7. ［System 1］画面で、数字の右側に黒色で表示されるスライダーをクリックしてから、キーボードの左矢印キーと右矢印キーを使って、pusher offset を調整します。左右対称のピーク形状を最高の優先度として、分解能やピーク形状、および感度が最適になるよう調整します。
8. 分解能がステップ 2 で記録した分解能以上になった場合、コンソールに移動し、［Normal］モード（［Intellistart］ > ［Configure］ > ［Normal］）を選択し、［Use calibration profile］を選択して［Start］を選択します。
9. uncal を参照して［OK］をクリックします。
10. ［MS Tune］画面で［System］（システム） > ［Acquisition］（取り込み）設定に戻り、［Calculate］（計算）をクリックして「Veff」を設定します。精密質量（ロックマス化合物、すなわち陽イオンモードでのロイシンエンケファリンの場合は 556.2771）を指定して［MS Tune］画面で観察された質量を測定質量の小数点以下 2 桁まで指定します。［Update］（更新）をクリックし、数秒待ってからウィンドウを閉じます。
11. 消去されている場合は、［ノーマライズ］を必ず選択してください（［MS Tune］画面のピークを右クリックし、［Intensity］（感度）> ［Nomalise Data］（データのノーマライズ）を選択します）。また、必要に応じて、ロックスプレーのキャピラリ電圧を通常値にリセットし、［System 2］（システム 2）タブで［Attenuate］（減衰）の選択を解除することもできます。
12. チューン設定とシステム設定を保存します。
13. キャリブレーションする他のすべてのイオンモードについて、このプロセスを繰り返します。
14. Intellistart を使って調整した装置をキャリブレーションします。この新たなキャリブレーションによって、質量精度が一層向上するはずです。

追加情報

新鮮なキャリブレーション溶液を調製します。

キャリブレーションする前に分解能を調整することが適切です。キャリブレーションの前に分解能を上げるよう推奨します。分解能を定期的に上げれば、調整労力の軽減になります。

分解能は、ソフトウェアで MS コンソールから最適化することができます。LockSpray 流路系からロイシンエンケファリンを注入してから、［Resolution optimization］（分解能の最適化） -> ［Leucine Enkephalin MS LS］（ロイシンエンケファリン MS LS）プロファイルを選択し、次に最適化する必要のあるモードを選択します。