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不十分な分解能または不良なピーク形状により、QTof(Xevo または SYNAPT)でのキャリブレーションが失敗する - WKB1813

Article number: 1813To English version

症状

  • Xevo または SYNAPT QTof でのキャリブレーションまたはキャリブレーションチェックが失敗する
  • キャリブレーションは実行されるが、一部のピークが一致せず、手動で追加できない(一致するピークは 1 つのみ)
  • ピークに感嘆符 (!) が付く場合がある
  • 高質量で残留質量が増加する(下図を参照)
  • 質量精度が不足している
  • GluFib での分解能が不十分

 


環境

  • MassLynx
  • IntelliStart
  • UNIFI
  • Synapt XS
  • Synapt G2-Si
  • Synapt G2-S
  • Synapt G2
  • Xevo G2-XS
  • Xevo G2-S
  • Xevo G2
  • Xevo QTof

原因

スペクトルの分解能が不十分か、またはピーク形状が不良です

解決策

  1. [MS Tune]画面を開き、[Setup](セットアップ) > [System View](システム画面の表示)を選択して分解能を調整します(パスワードは「access」)。
  2. [Tune]画面で[System](システム) > [Acquisition Settings](取り込みの設定)を選択します。画面左下に表示されている分解能の値(この分解能モードで予想される分解能)を書き留めてから、画面を閉じます。
  3. ロックマスのピークをズームインしてロックスプレーのキャピラリー電圧を下げるか、[System 2](システム 2) タブにアクセスして[pDRE Test](pDRE テスト)エリアで[Attenuate](減衰)を選択し、送信を調整することにより、カウントを中〜低 e4 カウントに調整します。または、[MS Tune]画面でピークを右クリックし、[Intensity](強度)> [Normalize Data](データのノーマライズ)を選択することもできます。この設定では、分解能を調整する際に強度が増減するかを確認できます。
  4. その形状を簡単に把握できますよう、ピークを拡大表示します。
  5. [System 2]画面で、数字の右側に黒色で表示されるスライダーをクリックしてから、キーボードの左矢印キーと右矢印キーを使って、reflectron grid を調整します。分解能を最高の優先度として、分解能やピーク形状、および感度が最適になるよう調整します。
  6. [System 1]画面で、数字の右側に黒色で表示されるスライダーをクリックしてから、キーボードの左矢印キーと右矢印キーを使って、pusher offset を調整します。左右対称のピーク形状を最高の優先度として、分解能やピーク形状、および感度が最適になるよう調整します。
  7. 分解能がステップ 2 で記録した分解能以上になった場合、コンソールに移動し、[Normal]モード([Intellistart] > [Configure] > [Normal])を選択し、[Use calibration profile]を選択して[Start]を選択します。
  8. uncal を参照して[OK]をクリックします。
  9. [MS Tune]画面で[System](システム) > [Acquisition](取り込み)設定に戻り、[Calculate](計算)をクリックして「Veff」を設定します。精密質量(ロックマス化合物、すなわち陽イオンモードでのロイシンエンケファリンの場合は 556.2771)を指定して[MS Tune]画面で観察された質量を測定質量の小数点以下 2 桁まで指定します。[Update](更新)をクリックし、数秒待ってからウィンドウを閉じます。
  10. 消去されている場合は、[ノーマライズ]を必ず選択してください([MS Tune]画面のピークを右クリックし、[Intensity](感度)> [Nomalise Data](データのノーマライズ)を選択します)。また、必要に応じて、ロックスプレーのキャピラリ電圧を通常値にリセットし、[System 2](システム 2)タブで[Attenuate](減衰)の選択を解除することもできます。
  11. チューン設定とシステム設定を保存します。
  12. キャリブレーションする他のすべてのイオンモードについて、このプロセスを繰り返します。
  13. Intellistart を使って調整した装置をキャリブレーションします。この新たなキャリブレーションによって、質量精度が一層向上するはずです。

追加情報

キャリブレーションする前に分解能を調整することが適切です。キャリブレーションの前に分解能を上げるよう推奨します。分解能を定期的に上げれば、調整労力の軽減になります。

分解能は、ソフトウェアで MS コンソールから最適化することができます。LockSpray 流路系からロイシンエンケファリンを注入してから、[Resolution optimization](分解能の最適化) -> [Leucine Enkephalin MS LS](ロイシンエンケファリン MS LS)プロファイルを選択し、次に最適化する必要のあるモードを選択します。