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溶出物および浸出物アプリケーション用の ACQUITY UPLC システムをクリーニングして、クロマトグラフィーの高いバックグラウンドおよび汚染を回避または除去する方法 - WKB101758

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目的または目標

溶出物および浸出物アプリケーション用の ACQUITY UPLC システムをクリーニングして、クロマトグラフィーの高いバックグラウンドおよび汚染を回避または除去する。

（ターゲット分析種は新しいシステムでバックグラウンドイオンとして観察されることが多いため、ACQUITY の据付後のクリーニングは非常に重要です。既存の汚染を除去し、バックグラウンド干渉を回避/低減するために、酸/塩基性/IPA 洗浄液を推奨します。この記事は WKB16167 の改訂版です。E&L アプリケーションに適しています。）

 

 Controlling Contamination in UPLC/MS and HPLC/MS Systems Guide（『UPLC/MS および HPLC/MS システムにおける汚染の管理ガイド』）(715001307)。

 

環境

  • ACQUITY UPLC

手順

  1. 現在のバックグラウンドを確立するには、ルーチンアプリケーションに使用するグラジエントと溶媒で 2 ～ 3 回のブランク注入（100% メタノール）を実行します。
  2. 最高品質の溶媒が使用されていることを確保し、500 mL の以下の溶媒を調製します。
    • 酸性洗浄液：25:25:25:25 IPA/メタノール/アセトニトリル/水 + 5% ギ酸
    • 基本洗浄：10% アンモニア、（HPS コンポーネントおよび MaxPeak Premier システムの場合は 0.1% 水酸化アンモニウム）
    • 純粋な IPA
    • 80:10 水/メタノール（シール洗浄液として）
  3. ACQUITY 洗浄手順を実行する前にカラムを取り外し、ユニオンと交換して接続します。アクティブプレヒーターのアウトレットチューブまたはカラムと交換するユニオンは廃液につながるはずです。
  4. サンプルループを使用する場合は、ループがサンプルマネージャに取り付けられていることを確認します。
  5. MS から LC の接続を外します。質量分析計に送液されない必要があります。
  6. 通常 LC-MS 流路にある PEEK ラインがすべて、クリーニングの流路に含まれていることを確認します。
  7. シール洗浄ラインを 90:10 水/メタノール中に、他のすべてのラインを酸性洗浄液中に入れます。
  8. 酸性洗浄液の入っているバイアルを、オートサンプラーの位置 1:A,1 にロードします。
  9. ACQUITY ラインをすべてフラッシュ洗浄します：A ラインおよび B ラインを 5 分間、10 サイクルプライムする必要があります。サンプルシリンジを含むシリンジのプライムは、酸性洗浄液を使用して実行してください。シール洗浄は、90:10 水/メタノールで 5 分間プライムする必要があります。
  10. 酸性洗浄液の注入を 10 回実行します。「LC METHOD 1」を使用してから、「LC METHOD 2」を使用して酸性洗浄液を 10 回注入します。必要に応じて、ダミーの MS メソッドを作成してロードします。注入量は 10 µL です。

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10. 水でフラッシュ洗浄して酸をシステムから除去します。注入は必要ありません。シール洗浄を除くすべての ACQUITY ラインを塩基性洗浄液中に入れます。A ラインおよび B ラインは、5 分間、10 サイクルをプライムする必要があります。サンプルシリンジを含むシリンジのプライムは、塩基性洗浄液を使用して実行する必要があります

11. 塩基性洗浄液の入っているバイアルを、オートサンプラー位置 1:A,2 にロードします。

12. 塩基性洗浄液の注入を 10 回実行します。「LC METHOD 1」を使用してから、「LC METHOD 2」を使用して塩基性洗浄液を 10 回注入します。

13. 水でフラッシュ洗浄して塩基をシステムから除去します。注入は必要ありません。シール洗浄を除くすべての ACQUITY ラインを IPA 中に入れます。A ラインおよび B ラインは、5 分間、10 サイクルをプライムする必要があります。サンプルシリンジを含むシリンジのプライムは、IPA を使用して実行する必要があります。

14. IPA の入っているバイアルを、オートサンプラー位置 1:A,3 にロードします。

15. IPA の注入を 10 回実行します。「LC METHOD 1」を使用してから、「LC METHOD 2」を使用して IPA を 10 回注入します。

16. ACQUITY 溶媒ラインを適切な溶媒中に入れますが、使用されていないラインはそのまま IPA 中に残します。

17. ルーチンアプリケーションに使用するグラジエントと溶媒でブランク注入を実行し、洗浄前のブランク注入と比較します。

洗浄前と洗浄後のメタノールブランク試料の例をここに示します。（これらの例はガイダンス用であり、システム仕様ではないことに注意してください。）

洗浄前 - メタノールブランク試料

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洗浄後 - メタノールブランク試料

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追加情報

 

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