PEG などによる激しい汚染に対し、酸/塩基洗浄プロトコルを使用して ACQUITY UPLC を洗浄する方法 - WKB16167

注意 - 高濃度の塩基や酸がコーティングを損傷するため、HPS コーティング付き部品を含む ACQUITY Premier LC モジュールの洗浄グに、この手順を使用しないでください。代わりに、KCS wkb116495 に添付されている Premier の手順を使用してください

注：ACQUITY Premier BSM ポンプおよび QSM ポンプには HPS コーティングされた部品が含まれていないため、出力がサンプルマネージャから切断され、廃液に転流されている場合は、この手順を使用してポンプをフラッシュ洗浄できます。酸/塩基洗浄後は、サンプルマネージャに接続し直す前に、ポンプは水と IPA でフラッシュ洗浄してすべてのアンモニアを除去する必要があります

目的または目標

ACQUITY UPLC が不良な溶媒により PEG で汚染されている場合、バックグラウンドが常に検出されます。良好な溶媒に切り替えても、Vion、Xevo G2-XS、Synapt G2-Si のような高感度質量分析計では、PEG バックグラウンドは、なかなか消えません。BioAccord (RDa) または Vion を用いたモノクローナル抗体の直接分析で、フロンティングスペクトルピークが観測される場合、このプロトコルは使用できます。もちろん、このプロトコルは他の汚染物にも使用できます。この手順では、酸/塩基 洗浄プロトコルに従って ACQUITY を洗浄する方法について説明します。LC パージキット 186010210 を注文して酸/塩基の洗浄手順を実施してください。

環境

• ACQUITY UPLC
• ACQUITY UPLC I-Class
• ACQUITY UPLC H-Class

手順

1. UPLC カラムを取り外し、ユニオンに交換します。
2. 溶媒ラインシンカー/フィルターを取り外し、すべての溶媒ライン（ソルベントマネージャおよびサンプルマネージャ）を各フラッシュ洗浄ステップごとに各溶媒ボトルに入れます。クリティカルクリーニングガラスボトルキット（注文_カタログ）を使用します。
3. すべての溶媒ラインを、以下に記載されている正確な順序で溶媒でラインごとに 5 分間パージします。
4. サンプルマネージャのライン（シリンジおよび洗浄）をパージします。
5. MS バルブを［廃液］* に設定する 1 分間の MS メソッドを作成します。UV や PDA などの光学検出器の場合、送液は検出器を通過できます。
6. インレットメソッドとサンプルリストを作成し、洗浄溶媒 10 uL を 20 回注入し、実行時間を 1 分、流量を 0.8 mL/分、50:50 (BSM) または 25:25:25:25 (QSM) で実行します。
   1. 水でフラッシュ洗浄してお客様の移動相をシステムから除去します。
   2. 10% NH4OH 水溶液（これにより、PEG および他のポリマーが除去される）。
   3. ライン A1 および A2 を 10% NH4OH で、ライン B1 および B2 を 100% IPA で（H-class の場合、A および B を 10% NH4OH で、C および D を 100% IPA で）洗浄します。これは、PEG を除去するための非常に強い組み合わせ溶媒です。
   4. 水でフラッシュ洗浄して、塩をシステムから除去します。
   5. 2 ～ 10%ギ酸を含むマジックミックス（水：アセトニトリル：メタノール：IPA 1:1:1:1）（アセトニトリルの代わりにアセトンを使用できます。キット 186010210 を注文してアセトンを入手できます）
   6. 水でフラッシュ洗浄して、酸をシステムから除去します。
   7. 100% IPA
   8. 最後のすすぎとして水でフラッシュします。。
7. メタノールまたは IPA を溶離液として使用していない場合は、古いシンカーストーンを新しい SS ストーンまたはチタンストーン (289002172) に交換してください。

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追加情報

実際には 10％ アンモニア溶液が最終濃度である必要があります。このため、28 ～ 30％ のアンモニアのストック溶液を使用する場合、それは3倍希釈にすぎません。非常に激しい臭いのため、調製するためにドラフトを使用し、機器にボトルを置くときには、さらに十分注意してください。

このプロトコルを M-Class で使用しないでください。PeekSil とシリカチューブは、これほど高い pH には対応しません。

ステップ 8 で、すすぎ用の水の pH をモニターして、カラムと MS を再び流路に取り付ける前に、ラボの pH に戻っていることを確認します。

全ての水性移動相を毎週再調製し、マジックミックス（25/25/25/25 水/イソプロピルアルコール/メタノール/アセトニトリル）または 100% 有機溶媒（メタノールまたはアセトニトリル）でボトルを 3 回すすぎ、再充填する前に使用する溶媒ですすぎます。移動相溶媒は絶対に満タンにしないでください。移動相ボトルは絶対に皿洗い機に入れないでください。

* 質量分析計を使用する場合は、洗浄ステップの前に MS 流路系を廃液に接続するか分流させるように設定します。これによりバルブは損傷されませんが、ソースに流れないようにしてください。