2475 蛍光検出器で蛍光単位をノーマライズする方法 - WKB193270
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目的または目標
2475 検出器の蛍光単位を標準的な水を基準にしてノーマライズを行う。
環境
2475 蛍光検出器
手順
システムに溶媒または移動相を送液する前に、ろ過、脱気、およびスパージした HPLC グレードの水でラインをフラッシュ洗浄します。次に、混和性の問題がない場合は、1 mL/分で最低 15 分間移動相を送液します。
蛍光単位をノーマライズするには:
- 検出器の電源を入れ、少なくとも 1 時間ウォームアップと安定化を行います。
- 脱気した清浄な水を 1 mL/分(または気泡の生成を回避できる流量)でフローセルに送液します。
- [DIAG](診断)を押してから、[1 Normalize Units](1 単位のノーマライズ)を押します。
検出器で PMT ゲインが調整され、励起用モノクロメーターの波長が 350 nm に設定されます。蛍光モノクロメーターにより 390 ~ 405 nm の波長でスキャンが行われ、水のラマンシグナル (397 nm) が検出され、ノーマライズ定数のずれにより発生する波長の正確度エラーが最小になります。蛍光モノクロメーターでこのシグナルピークが検出されると、PMT ゲインが最適化され、ノーマライズ定数が表示されます。
完了時のノーマライズ値
ランプおよび光学系の使用時間と共に、ラマンゲインは最高 1000 まで徐々に増加するので、ラマンカウントの値は低下する可能性があります。水のラマンピークが 397 nm から 3 nm の範囲内である場合、ノーマライズの単位が検出器のメモリ内に組み込まれます。
追加情報
シグナルがその範囲外である場合、検出器にその値は保存されず、前の定数が保持されます。
ヒント:ラマンシグナルが 397 nm から 3 nm の範囲にない場合、通常、純粋な水以外のものがフローセル内にあるか、フローセルが汚れています。
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