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ピークトラッキングの使用方法 - Tip 109

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目的または目標

Get Empowered! へようこそお戻りになりました。Empower クロマトグラフィーデータソフトウェアに関する前回の Empower 今週のヒント記事で、［解析メソッド］または［メソッドセット］で［生成チャンネル］を使用してクロマトグラムをスムージングする方法を学習しました（ヒント#108）。

Empower で ACQUITY QDa MS データを使って作業する：

  • ＃100：クロマトグラムのピークの基本質量と質量スペクトルを表示する方法
  • ＃101：2D ACQUITY QDa MS データの処理方法
  • ＃103：［質量分析］画面でさまざまなスペクトルビューを表示する
  • ＃104：［質量分析］画面で作業中にクロマトグラムとスペクトルを抽出する
  • ＃105：PDA および QDa 質量検出器の両方からデータを収集する際に、クロマトグラムの位置を合わせることが重要な理由
  • ＃106：TIC プロットで作業するのではなく、単一の質量を抽出して感度を最適化する方法
  • ＃107：［解析メソッド］を使用してクロマトグラムをスムージングする方法
  • ＃108：［メソッドセット］で［生成チャンネル］を使用してクロマトグラムをスムージングする方法

今週は、ピークトラッキングについて学びます。典型的な逆相メソッドの開発シナリオには、異なるカラムを試行すること、および移動相の強い溶媒を変化させることが含まれます。この課題は、実験ごとにピークをトラッキングすることです。目的の化合物の UV スペクトルのライブラリーを PDA で構築し、Empower で各ピークの頂点スペクトルとライブラリーのスペクトルを一致させることができます。これは UV スペクトルが目的の化合物に対して十分に異なる場合にはうまくいきます。代わりのアプローチは、ACQUITY QDa 質量検出器を使用して m/z 比によってピークをトラッキングすることです。次に、割り当て量を使用してピークトラッキングを要約できます。

それでは始めましょう。

環境

  • Empower

手順

  1. ［解析メソッド］の［MS 3Dチャンネル］タブで、まず［割り当てられた質量］のスペクトルドロップダウンリスト（図 1）から「頂点」または「バックグランド除去」を選択して、ピークトラッキングが有効になります。（「バックグランド除去」の説明については、ヒント＃103 を参照してください）
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図 1

  1. 希望する精度を設定します（図 2）。
59742-02.png

図 2

  1. ［解析メソッド］に変更を保存し、［サンプルセット］をプロセスします。［ピークトラッキング成分サマリー］テーブルが含まれている「全サマリーレポートメソッド」を作成します（図 3）。
59742-03.png

図 3

  1. これにより、ピークが［割り当てられた質量］別に要約されます。クロマトグラフィー条件が異なることにより、ピークをトラッキングできます。例えば、質量「182」、および 8 回の実験にわたる質量を伴うピークの保持時間が、確認されます（図 4）。
59742-04.png

図 4

  1. では、［結果セット］を見ていきましょう。最初の結果では、「割り当てられた質量」、「割り当てられた質量値」、「注記」フィールドがピークテーブルに追加されています（図 5）。［頂点スペクトル］または［スペクトルのバックグランド除去］のいずれかのベースピーク値が、［解析メソッド］で設定された精度を使用して［割り当てられた質量値］フィールドにコピーされます。
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図 5

  1. この結果、ピーク 6 と 7 は融合しており、同じ［割り当てられた質量］を持っていることが分かります。Empower によって、これらの［割り当てられた質量］に数字が付加されています（図 6）。では、割り当てを評価しましょう。
59742-06.png

図 6

  1. ［質量分析］画面で、これら 2 つのピークの［純度］ビューを確認します。（［純度］ビューの説明については、ヒント＃103 を参照してください）。2.483 分のピークが 196 の質量を有し、202 が 2.465 分にピークから来ると決定します（図 7）。
59742-07.png

図 7

  1. メイン画面に戻り、ピーク 2.483 分の行を右クリックし、［割り当てられた質量の修正］（図 8）を選択します。
59742-08.png

図 8

質量とノートを入力し、［OK］をクリックします（図 9）。

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図 9

ピークテーブルが更新されました（図 10）。結果を保存します。

59742-10.png

図 10

  1. ［結果セット］を再度要約すると、マニュアル割り当てを含む新しいサマリーが表示されます（図 11）。
59742-11.png

図 11

簡単ですね！

追加情報

最後の注記：

  • 詳細については、アプリケーションノート集：Streamline Method Development with Empower 3 MS Peak Tracking（『Empower 3 MS ピークトラッキングによるメソッド開発の効率化』）を参照してください。
  • この手順は、クイックスタートまたはプロフェッショナルインターフェイスを使用して実行できます。
  • ACQUITY QDa 質量検出器は Alliance HPLC システムと適合性があります。

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